部分酶解酵母高效电击转化研究

以酵母质粒YCp50为外源DNA,电击转化部分酶解酵母宿主菌AB1380,转化效率稳定在10~6转化子/μg质粒DNA左右,比不酶解酵母或酵母原生质球作受体的电击转化效率高一个数量级以上,也比PEG介导的酵母原生质球转化高3～5倍,而且适合于大片段DNA如水稻YAC分子的转化。达最佳转化时的有关技术参数为:新接菌种通气培养至细胞密度1×10~8～1.5×10~8个/ml;转化时细胞密度控制在1×10~9～1.5×10~9个/ml;每毫升酶解缓冲液加15u溶菌酶(lyticase),30℃下处理酵母5min进行部分酶解;电击时,电场设置在6.25kV/cm、电容25μF,电击后直接铺板。     

兔核移植胚胎起始发育的超微结构研究

对兔核移植胚胎起始发育的超微结构变化进行电镜观察,并与供体桑椹胚细胞,受体卵母细胞及同期正常受精胚胎的超微结构进行比较,“原核”期兔核移植胚胎的超微结构明显不同于供体桑椹胚细胞及受体卵母细胞的超微结构,而与同期正常受精胚胎相似,但有些核移植胚胎中皮质反应,及核仁和线粒体中出电子致密的网眼结构,与正常受精卵存在差别,分裂至２－细胞期时,与正常２－细胞胚超微结构更相似,结果提示,兔胚胎细胞核移植后,供     

贝氏隐孢子虫在珍珠鸡体内发育的扫描电镜观察

采用扫描电镜观察了贝氏隐孢子虫在珍珠鸡体内的发育。大量球形虫体镶嵌于气管和法氏囊微绒毛丛中。气管纤毛消失,微绒毛生发生融合。法氏囊粘膜表面可观察到宿主细胞突起,在突起的表面有数个虫体寄生。滋养体呈球状,平均大小为１．７μｍ。裂殖体拥有４个或８个香蕉状裂殖子。成熟大配子体大小为 ４.２ × ３．３μｍ,在其侧面可观察到锯齿状突起。偶尔能观察到卵囊,其表 面有一明显裂缝。虫体逸出后所留下的带虫空泡似弹坑状,根据其结构可将其分为两类,其中一类为裂殖子或小配子的形成场所,另一类为卵囊的形成场所。     

汉防己多糖的研究

从汉防己根热水提取液中,分离得到两种葡聚糖,高效液相色谱法测得分子量为９．３×１０３和２．０×１０６,经甲基化分析、过碘酸盐氧化、Ｓｍｉｔｈ降解和部分酸水解确定两种多糖可能均以ａ（１→４）连接形成主链,在６－Ｏ上有分枝,两者分枝的类型和数目有所不同。     

人分裂细胞核抗原基因片段的筛选、测序及对启动子的分析

经６．６×１０５个克隆筛选,从装在λ噬菌体载体Ｃｈａｒｏｎ３０中的人基因库中筛选到了一个含人分裂细胞核抗原（ＰＣＮＡ）基因的克隆。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析插入基因长约１４ｋｂ,有较长的５＇上游区,但３＇端缺少一部分。经亚克隆和测序已确定从５＇上游１２６３ｂｐ到３＇端与λ载体接点共４９６９ｂｐＰＣＮＡ基因片段的核苷酸序列。将ＰＣＮＡ基因启动子核苷酸序列与ＤＮＡ聚合酶α,拓扑异构酶Ⅱα,胸苷酸激酶基因的启动子进行比较有３０％以上同源性,具有“看家基因”特征。在转录起始点的５＇上游几百ｂｐ的范围内都有与ＣＡＴ,ＳＰ１,Ｅ２Ｆ,ＮＦＨＢ,Ｏｃｔ１和ＡＴＦ等转录因子的结合位点相似的核苷酸序列。     

反相胶束体系中辣根过氧化物酶的活力和动力学性质

本文系统研究辣根过氧化物酶在ＣＴＡＢ／Ｈ２Ｏ／ＣＨＣ．３－ｉｓｏｏｃｔａｎｅ（１∶１,Ｖ／Ｖ）反相胶束体系中的催化行为。在一定条件下酶反符合Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ－Ｍｅｎｔｅｎ动力学。研究水含量、底物浓度、ＰＨ、温度、表面活性剂的浓度等对酶反应的影响,结果表明表面活性剂对酶表现非竞争性抑制作用,高浓度的过氧化氢抑制酶活,最适ＰＨ为７．０。在低水含量（Ｗ０＜５）的胶束体系中保温后,酶的活力发生不可逆的改     

牛病毒性腹泻病毒的成熟和释放

试验中用电镜观察了牛病毒性腹泻病毒ＯｒｅｇｏｎＣ２４Ｖ株在感染新生牛睾丸细胞中的形态发生。成熟的病毒颗粒是直径约为５０ｎｍ的球形颗粒,内含直径约为３０ｎｍ的核心。病毒在宿主细胞的胞质内复制,通过糙面内质网膜出芽成熟。病毒可以通过外排或在细胞死亡后含有病毒颗粒的空泡崩溃而释放到胞外。     

中国茶对变形链球菌的抑菌作用

对３６只ｓｐｒａｑｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ鼠分４组给予诱龋饲料（Ｄｉｅｔ２０００,ｋｅｙｓ）,并连续５天在口腔内接种变链菌６７１５菌株,分别给予我国主要产茶区的三种茶浸液：龙井绿茶（Ｂ组）,四川涪陵红茶（Ｃ组）,乌龙茶（Ｄ组）,先用０．５ｇ茶和５０ｍｌ双蒸馏水加热煮沸过滤后浸泡１０分钟以及对照组（Ａ组）用双蒸馏水为饮料喂养实验鼠。实验６０天后,杀鼠观察计算鼠磨牙面的菌落形成单位（ＣＦＵ）和菌斑指数（ｐｌａｑｕｅｓｃｏｒｅ）均显著下降。实验结果,实验组和对照组菌斑指数下降值顺序如下：Ｃ组＞Ｄ组＞Ｂ组＞Ａ组,并与实验组含氟量有相关性。很多研究表明变链菌是较为肯定的致龋菌、茶中氟化物对变链菌生长、粘附都有抑制作用。本研究选用茶来源广泛、价廉、无毒安全等优点,为开拓新的防龋方法进行探索。     

Normal and expanded Huntington's disease gene alleles produce distinguishable proteins due to translation across the CAG repeat.

BACKGROUND: An expanded CAG trinucleotide repeat is the genetic trigger of neuronal degeneration in Huntington's disease (HD), but its mode of action has yet to be discovered. The sequence of the HD gene places the CAG repeat near the 5' end in a region where it may be translated as a variable polyglutamine segment in the protein product, huntingtin. MATERIALS AND METHODS: Antisera directed at amino acid stretches predicted by the DNA sequence upstream and downstream of the CAG repeat were used in Western blot and immunohistochemical analyses to examine huntingtin expression from the normal and the HD allele in lymphoblastoid cells and postmortem brain tissue. RESULTS: CAG repeat segments of both normal and expanded HD alleles are indeed translated, as part of a discrete approximately 350-kD protein that is found primarily in the cytosol. The difference in the length of the N-terminal polyglutamine segment is sufficient to distinguish normal and HD huntingtin in a Western blot assay. CONCLUSIONS: The HD mutation does not eliminate expression of the HD gene but instead produces an altered protein with an expanded polyglutamine stretch near the N terminus. Thus, HD pathogenesis is probably triggered by an effect at the level of huntingtin protein.     

湖北南襄盆地枣阳凹陷第三纪轮藻化石及其地层意义

本文研究了南襄盆地枣阳凹陷第三系玉皇顶组到凤凰镇组轮藻化石。共划分出４个组合,其时代分别属早始新世、中始新世、晚始新世和渐新世。